白芷为伞形科植物白芷Angelica dahurica(Fisch.ex Hoffm.)Benth.et Hook.f.或杭白芷Angelica dahurica (Fisch.ex Hoffm)Benth.et Hook.f.var.formosana(Boiss.)Shan et Yuan的干燥根,具有散风除湿、通窍止痛、消肿排脓的功效,主要用于感冒头痛、眉棱骨痛、鼻塞、鼻渊、牙痛、白带异常、疮疡肿痛[1]。现代研究证明,其镇痛有效成分主要为香豆素类物质:如欧前胡素、异欧前胡素等。据此,在实验中采用L9(34)正交设计实验,选择影响白芷乙醇提取工艺的4个重要因素,即乙醇浓度、提取时间、提取次数、乙醇用量,每个因素设3个水平,以水浸出物量(干膏率)、白芷香豆素含量为指标进行正交实验,并根据实际情况并参照常用比例将水浸出物量(干膏率)、白芷香豆素含量的权重系数分别定为0.3,0.7,从而筛选白芷乙醇提取最佳工艺。现报道如下。 1 仪器与材料 1.1 仪器 UV-VIS8500分光光度计;电子天平BP121S;欧前胡素对照品(供含量测定用,批号为110826-200511,由中国药品生物制品检定所提供);其它试剂均为分析纯。 1.2 药材 本实验所用白芷药材购于四川省中药材公司,经成都中医药大学中药鉴定教研室鉴定为伞形科植物白芷Angelica dahurica (Fisch.ex Hoffm.)Benth.et Hook.f.的干燥根。 2 方法与结果 2.1 粉碎度的考察 2.1.1 样品溶液的制备取白芷适量,粉碎,分别称取过10目,20目,30目的样品各20 g,分别加入8倍量75%乙醇,提取3次,3 h/次,药液滤过,分别定至500 ml,备用。 2.1.2 白芷总香豆素含量测定照紫外分光光度法(《中国药典》2005年版Ⅰ部附录IV A)测定。 精密量取欧前胡素对照品溶液(0.0522 mg/ml)1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 ml,分别置于10 ml量瓶中,用甲醇定容至刻度,以甲醇作为空白液。于300 nm处测定A值,以浓度(C)对吸收度(A)回归。得回归方程:A 2.2 乙醇提取工艺研究[3~6] 2.2.1 样品溶液的制备取白芷,粉碎,过20目筛,按所选因素及水平(见表2),采用L9(34)正交表设计实验(见表3)进行白芷提取,得9号样品溶液,备用。表1 粉碎度考察实验结果(略) 2.2.2 水浸出物量(干膏率)的测定精密吸取上述备用液30 ml,分别置于已干燥至恒重的蒸发皿中,水浴蒸干,置烘箱中干燥3 h(105℃),取出,置于干燥器中放置30 min,称重,计算干膏收得率。 2.3 白芷总香豆素含量测定照紫外分光光度法(《中国药典》2005年版Ⅰ部附录IV A)测定精密量取备用液0.8~1.6 ml于100 ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,作为供试品液,测定,代入上述回归方程,计算,即得。 2.4 实验结果采用中国医统软件包(PEMS)进行处理分析,结果见表2~4。表2 因素水平(略)表3 正交实验设计及结果(略) 3 结论 从以上粉碎度考察实验结果可以看出,采用过20目筛的白芷粗粉进行提取,提取效果较好;从正交实验方差分析结果可以看出,B因素有显著的影响,影响因素B>C>A>D;且B3,C3,A2,D1为最佳,故白芷乙醇提取最佳工艺为:加8倍量75%乙醇,提取3次,3 h/次。表4 方差分析(略) 4 讨论 在粉碎度考察实验中,发现粉碎度过细,提取率反而下降,故白芷提取过程中不宜粉碎过细,避免提取过程中产生糊化现象,影响提取效果。【参考文献】 [1]国家药典委员会.中国药典,Ⅰ部[S].北京:化学工业出版社,2000:69.
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